Z6尊龙凯时

  DNA复制和RNA转录的基于相同的基因组模板，因此会泛起基因转录的偏向与复制叉的偏向相对的情形，即转录-复制冲突（TRCs），TRCs会诱导形成R-loops并引起基因组不稳固，类似的征象也爆发在植物中
。

  此前，清华大学孙前文研究员实验室揭晓在The Plant Cell（2017）的研究发明，定位于叶绿体AtRNH1C卵白可以与AtGyrases互作，消除TRCs和R-loops，从而维持基因组稳固性，atrnh1c突变体则泛起R-Loops过量积累，从而导致叶绿体DNA断裂和植物叶片发黄、矮小等生长缺陷
。其中叶绿素荧光成像实验效果为在Z6尊龙凯时生态手艺公司Eco-lab实验室相助完成
。（相关阅读：核糖核酸酶H与DNA解旋酶协作以限制拟南芥叶绿体R环水平并且维持基因组稳固性）

  2024年清华大学生命学院孙前文研究员实验室在该研究领域又获突破，在Nature Communications杂志上揭晓了题为 “Primase promotes the competition between transcription and replication on the same template strand resulting in DNA damage”的论文，展现了叶绿体中TRCs导致DNA损伤的分子机制
。其中，依旧使用了FluorCam叶绿素荧光成像举行了突变体光合表型判断的事情：

• 引物酶ATH通过增进TRCs，加剧R-loop积累和DNA损伤

  研究中对atrnh1c举行EMS诱变筛选出多个突变体，使用Fluorcam叶绿素荧光成像等手艺对他们举行了表型判断，其中acs1（atrnh1c抑制突变体）的Fv/Fm相比atrnh1c显着升高
。其他要领的判断效果配合说明晰acs1恢复了拟南芥的基因稳固性
。

图：叶绿体引物酶ATH点突变抑制atrnh1c突变体叶绿素荧光成像效果

• 质体DNA聚合酶Pol1A的突变也能类似地拯救atrh1c突变体的缺陷

  叶绿体基因组的复制需要两种DNA聚合酶的加入，即Pol1A和Pol1B
。先前的研究批注，Pol1B不但加入复制历程，还具有DNA修复功效
。Fluorcam成像等判断效果批注，Pol1B和atrnh1c的双突变体（1cpol1b）体现出比atrnh1c更严重的叶绿体基因组退化和生长缺陷
。Pol1A和atrnh1c的双突变体（1cpol1a），与atrnh1c相比，生长缺陷、光合效率Fv/Fm、叶绿素含量以及每细胞叶绿体数目部分恢复PolIA功效缺失可镌汰TRCs，维持基因组稳固性
。

图：DNA聚合酶相关突变体的叶绿素荧光成像效果

详细研究内容请参考原文：https://doi.org/10.1038/s41467-023-44443-0

  Z6尊龙凯时Ecolab实验室拥有FluorCam叶绿素荧光成像/多光谱荧光成像系统、FluorTron多功效高光谱成像系统、FluorTron光合表型成像系统等众多仪器装备，真诚接待列位先生来举行实验手艺交流和学术相助
。